一、標(biāo)準(zhǔn)概況

GB 23200.109-2018《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中二氯吡啶酸殘留量的測定 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》是由中華人民共和國國家衛(wèi)生健康委員會(huì)、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部和國家市場監(jiān)督管理總局聯(lián)合發(fā)布的一項(xiàng)食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)。該標(biāo)準(zhǔn)于2018年6月21日發(fā)布，2018年12月21日正式實(shí)施。

本標(biāo)準(zhǔn)由北京市農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)環(huán)境保護(hù)研究所負(fù)責(zé)起草，主要完成人包括賈春虹、趙爾成、余蘋中、陳莉、賀敏、王東、靖俊杰等專家。該標(biāo)準(zhǔn)系國內(nèi)首次發(fā)布，為植物源性食品中二氯吡啶酸殘留的檢測提供了首個(gè)國家標(biāo)準(zhǔn)層面的技術(shù)方法。標(biāo)準(zhǔn)的建立有效完善了《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763）中二氯吡啶酸配套的標(biāo)準(zhǔn)檢測方法。

二、制定背景

2.1 二氯吡啶酸的基本性質(zhì)

二氯吡啶酸（Clopyralid，CAS號(hào)：1702-17-6）是一種吡啶羧酸類除草劑，化學(xué)式為C?H?Cl?NO?。該農(nóng)藥廣泛用于防除闊葉雜草，在谷物、甜菜、油菜等作物種植中應(yīng)用普遍。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)制定的必要性

在GB 23200.109-2018發(fā)布之前，食品中二氯吡啶酸殘留量的檢測方法標(biāo)準(zhǔn)相對(duì)缺乏。隨著二氯吡啶酸在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的大量使用，植物源性食品中其殘留的潛在風(fēng)險(xiǎn)日益受到關(guān)注，迫切需要建立一套科學(xué)、規(guī)范、統(tǒng)一的檢測方法。該標(biāo)準(zhǔn)的出臺(tái)及時(shí)填補(bǔ)了這一空白，針對(duì)谷物、油料、蔬菜、水果、堅(jiān)果、調(diào)味料等10類植物源性食品建立了二氯吡啶酸殘留的測定方法。

從監(jiān)管層面看，GB 2763規(guī)定了二氯吡啶酸在各類食品中的最大殘留限量（MRL），但如果沒有配套的檢測方法標(biāo)準(zhǔn)，MRL的監(jiān)督執(zhí)法就缺乏技術(shù)依據(jù)。GB 23200.109-2018的發(fā)布，使二氯吡啶酸的殘留限量管理形成了“限量標(biāo)準(zhǔn)+檢測方法"的完整閉環(huán)。例如，在小麥中二氯吡啶酸的最大殘留限量為2 mg/kg，甜菜中也為2 mg/kg，均明確參照GB 23200.109規(guī)定的方法測定。

三、方法原理

該標(biāo)準(zhǔn)采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS） 進(jìn)行測定，其基本原理可概括為以下流程：

提取 → 凈化 → 色譜分離 → 質(zhì)譜檢測 → 外標(biāo)法定量

具體而言：

1.       提取：試樣中的二氯吡啶酸經(jīng)酸化乙腈（乙腈-乙酸溶液，98+2）提取。酸化條件能夠有效提高二氯吡啶酸這種酸性農(nóng)藥在有機(jī)相中的萃取效率。

2.       凈化：提取液經(jīng)固相吸附劑分散凈化處理，采用石墨化炭黑（60 μm～80 μm） 作為凈化材料。該凈化方式能夠有效去除樣品中的色素、油脂等干擾物質(zhì)，是QuEChERS方法的核心技術(shù)環(huán)節(jié)。

3.       檢測與定量：凈化后的樣品溶液經(jīng)液相色譜分離、串聯(lián)質(zhì)譜檢測，采用外標(biāo)法進(jìn)行定量分析。

四、試劑與材料

標(biāo)準(zhǔn)對(duì)實(shí)驗(yàn)所用試劑和材料作出了嚴(yán)格規(guī)定：

4.1 主要試劑

除特別說明外，所用試劑均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水須符合GB/T 6682中規(guī)定的一級(jí)水要求。

4.2 溶液配制

·         乙腈-乙酸溶液（98+2） ：吸取2 mL乙酸加入到98 mL乙腈中，混勻。

·         甲酸溶液（0.1+99.9） ：吸取0.1 mL甲酸加入到99.9 mL水中，混勻。

4.3 標(biāo)準(zhǔn)品與標(biāo)準(zhǔn)溶液

二氯吡啶酸標(biāo)準(zhǔn)品純度要求＞99.0%。

·         標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（100 mg/L） ：準(zhǔn)確稱取二氯吡啶酸標(biāo)準(zhǔn)品10 mg（精確到0.1 mg），用乙腈溶解并定容至100 mL。于-18 ℃以下避光保存，有效期6個(gè)月。

·         標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（1 mg/L） ：準(zhǔn)確吸取1 mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用甲醇定容至100 mL。于0 ℃～4 ℃冰箱內(nèi)儲(chǔ)存，有效期1個(gè)月。

4.4 材料

·         石墨化炭黑：60 μm～80 μm

·         濾膜：0.22 μm，有機(jī)系

五、儀器與設(shè)備

標(biāo)準(zhǔn)要求配備以下主要儀器設(shè)備：

其中，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀是整個(gè)檢測系統(tǒng)的核心設(shè)備，其靈敏度、選擇性和準(zhǔn)確性直接影響檢測結(jié)果的質(zhì)量。電噴霧離子源（ESI）特別適合于二氯吡啶酸這類極性化合物的離子化。

六、分析步驟

該標(biāo)準(zhǔn)的分析流程主要包括以下環(huán)節(jié)：

6.1 樣品制備

根據(jù)樣品類型的不同（谷物、蔬菜、水果等），采用組織粉碎機(jī)或小型粉碎機(jī)對(duì)樣品進(jìn)行粉碎、混勻處理，確保樣品的代表性和均一性。

6.2 提取

稱取適量樣品，加入酸化乙腈（乙腈-乙酸溶液，98+2）作為萃取溶劑，經(jīng)高速均質(zhì)提取。酸化乙腈能夠有效提取樣品中的二氯吡啶酸，同時(shí)減少共提取物的干擾。這一提取策略與QuEChERS方法的基本思路一致。

6.3 凈化

提取液中加入氯化鈉和無水硫酸鎂進(jìn)行鹽析脫水和相分離，再經(jīng)石墨化炭黑分散固相萃取凈化。石墨化炭黑能夠有效吸附樣品中的色素和極性干擾物，是處理深色植物基質(zhì)（如菠菜、茶葉等）的關(guān)鍵凈化材料。

6.4 儀器分析

凈化后的樣品溶液經(jīng)0.22 μm有機(jī)系濾膜過濾后，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測。質(zhì)譜檢測采用電噴霧離子源（ESI） ，在多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式下進(jìn)行。二氯吡啶酸通常在正離子模式下檢測-，通過選擇特征母離子和子離子對(duì)實(shí)現(xiàn)高選擇性的定性定量分析。

6.5 定量

采用外標(biāo)法進(jìn)行定量分析，通過比較樣品溶液中目標(biāo)物的峰面積與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的峰面積，計(jì)算樣品中二氯吡啶酸的殘留量。

七、方法驗(yàn)證

該標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)過五個(gè)實(shí)驗(yàn)室的獨(dú)立驗(yàn)證，各項(xiàng)性能指標(biāo)均滿足殘留分析方法的要求。驗(yàn)證結(jié)果表明，該方法在準(zhǔn)確性、精密度、靈敏度等方面均達(dá)到了農(nóng)藥殘留檢測的技術(shù)規(guī)范要求，能夠滿足植物源性食品中二氯吡啶酸殘留量檢測的實(shí)際需求。

從方法學(xué)的角度看，該標(biāo)準(zhǔn)所采用的分散固相萃取（d-SPE）凈化策略與傳統(tǒng)的固相萃取（SPE）相比具有顯著優(yōu)勢：操作簡便、耗時(shí)短、溶劑消耗少。整個(gè)前處理過程可在較短時(shí)間內(nèi)完成，大大提高了檢測效率，適合大批量樣品的日常監(jiān)測。

八、標(biāo)準(zhǔn)修訂動(dòng)態(tài)

值得注意的是，GB 23200.109-2018目前正處于修訂升級(jí)過程中。根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布的征求意見稿，新標(biāo)準(zhǔn)擬將測定范圍從二氯吡啶酸單一農(nóng)藥擴(kuò)展至包括消螨酚、特樂酚、茅草枯、戊硝酚、草芽畏、毒菌酚、氯氨吡啶酸、申嗪霉素、氨氯吡啶酸、氨氯吡啶酸三異丙醇胺鹽在內(nèi)的11種農(nóng)藥。

從修訂內(nèi)容來看，新增的農(nóng)藥大多屬于酸性或極性較強(qiáng)的除草劑，與二氯吡啶酸在理化性質(zhì)上具有相似性，因此可以在同一色譜-質(zhì)譜條件下實(shí)現(xiàn)同時(shí)檢測。這一修訂方向體現(xiàn)了食品安全檢測標(biāo)準(zhǔn)向多殘留、高通量方向發(fā)展的趨勢。

此外，修訂征求意見稿在試劑配制方面也有調(diào)整，如將原有的“乙腈-乙酸溶液"調(diào)整為“乙腈-甲酸溶液（99+1）"，并增加了C18凈化材料和陶瓷均質(zhì)子等新內(nèi)容。檢測技術(shù)人員應(yīng)持續(xù)關(guān)注標(biāo)準(zhǔn)的最新動(dòng)態(tài)，及時(shí)跟進(jìn)方法變更。

九、標(biāo)準(zhǔn)的意義與應(yīng)用

9.1 完善了農(nóng)藥殘留檢測標(biāo)準(zhǔn)體系

GB 23200.109-2018的發(fā)布，使二氯吡啶酸這一重要除草劑在植物源性食品中有了配套的國家標(biāo)準(zhǔn)檢測方法。該標(biāo)準(zhǔn)與GB 2763《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》形成配套，為二氯吡啶酸最大殘留限量（MRL）的監(jiān)督執(zhí)法提供了可靠的技術(shù)依據(jù)。

9.2 保障了食品安全監(jiān)管

該標(biāo)準(zhǔn)為各級(jí)食品安全監(jiān)管部門、檢測機(jī)構(gòu)和食品生產(chǎn)企業(yè)提供了統(tǒng)一的、標(biāo)準(zhǔn)化的檢測方法。通過該方法對(duì)植物源性食品中二氯吡啶酸殘留量進(jìn)行監(jiān)測，可以有效控制相關(guān)食品安全風(fēng)險(xiǎn)。在GB 2763中，二氯吡啶酸在小麥、甜菜等作物中均設(shè)定了最大殘留限量，并明確要求按照GB 23200.109規(guī)定的方法進(jìn)行測定。

9.3 促進(jìn)了檢測技術(shù)的規(guī)范化

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法具有高靈敏度、高選擇性、高準(zhǔn)確性的特點(diǎn)，是目前農(nóng)藥殘留檢測的主流技術(shù)手段。該標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施推動(dòng)了LC-MS/MS技術(shù)在植物源性食品農(nóng)藥殘留檢測中的規(guī)范化應(yīng)用。同時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)所采用的QuEChERS前處理技術(shù)路線-，也為同類農(nóng)藥殘留檢測方法標(biāo)準(zhǔn)的制定提供了參考范式。

十、結(jié)語

GB 23200.109-2018作為一項(xiàng)重要的食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)，為我國植物源性食品中二氯吡啶酸殘留量的檢測提供了科學(xué)、規(guī)范的技術(shù)方法。該標(biāo)準(zhǔn)方法原理清晰、操作流程規(guī)范、性能指標(biāo)可靠，在實(shí)際檢測工作中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

隨著食品安全標(biāo)準(zhǔn)的不斷更新完善，該標(biāo)準(zhǔn)也在持續(xù)升級(jí)——目前已有征求意見稿擬將其測定范圍從二氯吡啶酸單一農(nóng)藥擴(kuò)展至11種農(nóng)藥。這一修訂將進(jìn)一步拓展標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍，提升檢測效率，更好地滿足食品安全監(jiān)管的實(shí)際需求。檢測技術(shù)人員應(yīng)持續(xù)關(guān)注標(biāo)準(zhǔn)的最新動(dòng)態(tài)，及時(shí)跟進(jìn)方法變更，確保檢測工作的規(guī)范性和準(zhǔn)確性。